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用DNA探针同RNA分子杂交在测定一已知基因在某一细胞中是否表达时是很有用的,但不能用于检测转录起始位点、终
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A.②③
B.①③
C.①③⑤
D.①③④
A.②③
B.①③
C.③④
D.①④
爪蟾卵母细胞在卵的发育后期用3H-尿苷同步标记。从卵母细胞中分离的放射性细胞质总RNA与由成体爪蟾提取的且呈单链形式结合在滤膜上的DNA进行杂交。该RNA:DNA杂交分子与原肠胚期爪蟾胚胎的非标记细胞质总RNA相竞争。图13-3-68A是假设的结果。在另一相应但相反的实验中,放射性原肠胚期细胞质RNA(原肠胚期胚胎用3H-尿苷标记)与滤膜上的总DNA杂交,该RNA:DNA杂交分子与非标记的后期卵细胞质RNA相竞争,结果如图13-3-68B。
mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?
表9-3-10 | ||
滤膜上的DNA | 滤膜上的cpm | |
-RNase | +RNase | |
Ⅰ Ⅱ Ⅲ | 1250 1260 1240 | 1245 418 820 |
A.镜检法:在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液,以发现病原体
B.PCR是体外基因复制技术,可在几十分钟内把病原体基因扩展到数百万倍
C.酶联法:用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合,通过酶联反应,以发现病原体
D.NA探针技术:用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA 分子做探针,利用DNA分子杂交原理来检测病原体
A.Southern印迹法
B.Northern印迹法
C.astern印迹法
D.菌落杂交
E.ot印迹法
A.用 RNA探针检测 DNA片段
B.用RNA探针检测 RNA片段
C.用 DNA探针检测 RNA片段
D.用 DNA探针检测蛋白质片断