A.必须具备复制起点,能够自主复制
B.必须具备合适的酶切位点,供外源DNA片段插入
C.有一定的筛选标记,用于筛选
D.必须具有较高的拷贝数,便于制备
A.基因载体的选择与构建
B.目的基因与载体的连接
C.重组DNA分子导入受体细胞
D.筛选并克隆含重组体的受体细胞
E.表达目的基因编码的蛋白质
A.两个分子含有放射性
B.全部含有放射性
C.双链中各有一半含有放射性
D.所有分子的两条链都没有放射性
A.一种酶
B.用于检测疾病的医疗器械
C.一种抗体
D.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
爪蟾卵母细胞在卵的发育后期用3H-尿苷同步标记。从卵母细胞中分离的放射性细胞质总RNA与由成体爪蟾提取的且呈单链形式结合在滤膜上的DNA进行杂交。该RNA:DNA杂交分子与原肠胚期爪蟾胚胎的非标记细胞质总RNA相竞争。图13-3-68A是假设的结果。在另一相应但相反的实验中,放射性原肠胚期细胞质RNA(原肠胚期胚胎用3H-尿苷标记)与滤膜上的总DNA杂交,该RNA:DNA杂交分子与非标记的后期卵细胞质RNA相竞争,结果如图13-3-68B。
一种噬菌体核酸的A分子具有以下性质:(1)A不与甲醛反应,能透过硝酸纤维素滤膜;(2)在碱性条件下离心,发现有三种沉降组分;(3)A分子用大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ处理产生B分子;(4)B用DNA连接酶处理后转变为C;(5)在碱性条件下,C比A沉降更快,在含溴化乙锭的CsCl中C的浮力密度也低于A;(6)A变性后与poly(G)相互作用,在CsCl中产生三条带;(7)在γ-32P-ATP存在条件下用多核苷酸激酶处理A分子,产生三个放射性标记核苷酸;(8)只有在A用大肠杆菌碱性磷酸酶预处理后才能对(7)中的核苷酸进行标记;(9)A用溴化乙锭处理后导致粘度增加及沉降系数减小。A、B和C具有怎样的结构?
由MNNG(亚硝基胍)引起的诱变损伤的本质以及它从DNA上被修复的机制可以用下面的实验来鉴定。为了确定诱变损伤的本质,未经处理的细菌和已用低剂量MNNG处理的细菌都在含50μg/ml的3H-MNNG的培养物中培养10min。分离它们的DNA并水解成核苷酸,然后经过纸层析分析放射性的嘌呤,结果如图Q12.2所示:
图Q12.2 层析法分离未被处理和已被低剂量MNNG处理的细菌DNA中被标记的甲基化嘌呤实线表示未被处理细菌DNA中的甲基化嘌呤;虚线表示MNNG处理的细菌所得结果
为了研究诱变损伤切除的机制,首先纯化负责切除的酶,把不同量的酶(相对分子质量19000)和已被3H标记含0.26pmol突变碱基的DNA一起温育,分析切除动力学。在不同时间取样,分析DNA以确定还存在多少突变残基(图Q12.3)。当在5℃而不是37℃时重复这个实验时,虽然最初的切除速率较慢,却得到一样的终点。
图Q12.3纯化的甲基转移酶把3H标记的甲基从DNA上切除所示为纯化酶的量
A.质粒不仅存在于细菌中,某些病毒也具有
B.细菌的基因只存在于质粒上
C.质粒为小型环状DNA分子,存在于拟核(或细胞核)外的细胞质基质中
D.质粒是基因工程中的重要工具酶之一