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题目内容（请给出正确答案）

[单选题]

实验室内常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是（）。

A.DNA连接酶

B.DNA聚合酶Ⅰ

C.DNA聚合酶Ⅱ

D.DNA聚合酶Ⅲ

E.反转录酶

答案

A、DNA连接酶

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第1题

一般经体外酶切连接操作后的载体DNA或重组DNA其转化率低于具有超螺旋结构的质粒是由于其()发生改变。

一般经体外酶切连接操作后的载体DNA或重组DNA其转化率低于具有超螺旋结构的质粒是由于其（)发生改变。

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第2题

限制性内切核酸酶Bgl Ⅱ识别的序列为A↓GATCT，BamH Ⅰ识别的序列为G↓GATCC，用它们分别切割载体DNA和供体DNA，不

必使酶失活就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。

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第3题

基因工程操作需要用一些基本的工具酶，它们大多数来源于各种微生物。如基因与载体的切割和连接要用

各种________酶和________酶，DNA的体外合成、测序要用________酶、________酶；RNA反转录要用 ________酶等。

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第4题

常用的目的基因与载体的连接方法有哪些？

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第5题

A．基因载体的选择与构建 B．目的基因与载体的连接 C．重组DNA分子导入受体细胞 D．筛选并克隆含重组体的受

A.基因载体的选择与构建

B.目的基因与载体的连接

C.重组DNA分子导入受体细胞

D.筛选并克隆含重组体的受体细胞

E.表达目的基因编码的蛋白质

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第6题

从动植物细胞匀浆中提取基因组DNA时，常用EDTA、氯仿 - 异戊醇混合液和95％乙醇试剂。请根据蛋白

质和核酸的理化性质回答：

(1)该实验中这些试剂各起什么作用？

(2)举出一种可以鉴定所提取基因组的DNA中是否残留有RNA 的方法。

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第7题

克隆的进行依赖于各种参与DNA新陈代谢的______的使用，它们主要是从原核细胞中分离的。______能够将DNA切割成

特定大小的片段。各种各样的DNA聚合酶也是克隆所必需的，包括将RNA转录出单链DNA的______。DNA______用于连接限制性片段。克隆也需要来源于微生物的DNA序列，包括用来运载被______克隆载体。质粒载体来源于天然细菌质粒，通常携带有______抗性基因。其他载体来源于噬菌体，如λ噬菌体，它们经过修饰后可以运输外源DNA。要想克隆一个感兴趣的真核生物的基因就必须先制作一个能与该基因杂交的______。人们已经发展了很多有效而精细的技术来分析克隆的DNA。例如，极微量的DNA片段可以通过______得到扩增。在感兴趣基因的启动子上连接，如______或______之类的______基因能够定量检测基因的活性。

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第8题

质粒是基因工程中最常用的载体，有关质粒的说法正确的是（)

A.质粒不仅存在于细菌中，某些病毒也具有

B.细菌的基因只存在于质粒上

C.质粒为小型环状DNA分子，存在于拟核(或细胞核)外的细胞质基质中

D.质粒是基因工程中的重要工具酶之一

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第9题

mRNA往往是用各种杂交技术检测的，也就是通过mRNA与单链DNA一起保温，形成DNA－RNA杂交物。有一种技术，把单链DN

mRNA往往是用各种杂交技术检测的，也就是通过mRNA与单链DNA一起保温，形成DNA-RNA杂交物。有一种技术，把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上，加上放射性标记的RNA，然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上，所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中，从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA，然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示，其中的数字表示离DNA左侧的距离，相对距离范围为0～100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验，吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase，该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA)；另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录？