用透析膜插片凝胶电泳法回收DNA片段时,再区带前挖一小槽,将透析膜置于槽中,这时应注意()
A.透析膜要接触DNA区带一侧的胶缘。
B.透析膜不能接触DNA区带一侧的胶缘。
C.透析膜要接触DNA区带相对一侧的胶缘。
D.透析膜不能接触DNA区带相对一侧的胶缘。
E.随意插入槽中即可。
A.透析膜要接触DNA区带一侧的胶缘。
B.透析膜不能接触DNA区带一侧的胶缘。
C.透析膜要接触DNA区带相对一侧的胶缘。
D.透析膜不能接触DNA区带相对一侧的胶缘。
E.随意插入槽中即可。
A.4个
B.3个
C.2个
D.至少2个
因子通常已经失活。你可以想出一个极好的方法以加快分析速度。你可以合成一段不含胞嘧啶核苷酸的DNA序列,将这段序列放到启动子后在一适当反应混合物中温育,这个启动子将指导不含鸟嘌呤核苷酸的转录本的合成,如果不加GTP,只产生一定长度的RNA转录本,这个RNA转录本来自于合成的DNA序列。因为其他转录本都在需G处被终止。如果你能使这个想法得到实现,则快速分析特殊序列的转录仅通过测量标记核苷酸的放射性就可实现。
为了验证你的想法,你构建两个携带合成DNA的质粒。一个具有腺病毒的启动子(PmL1),另一个无启动子(PC1)。把两种质粒同纯化的RNApolⅡ、纯化好的转录因子样品及32P-CTP混合,除此之外,再加入各种组合的GTP、RNaseT1(可以切开RNA与G的连接)和3'-氧甲基GTP(无论何时它参入正在形成的链,它就会终止转录),通过凝胶电泳测定结果如图13-3-42所示。
质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点:EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性;在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形,在圆周上以5.7kb总长标出刻度。
表16-2-11 | |
酶混合物 | 片段长度(kb) |
EcoRI EcoRI,BamHI EcoRI,HpaI EcoRI,SalI EcoRI,BglII EcoRI,PstI PstI,BglII BglII,HpaI | 5.7 0.4,5.3 0.5,5.2 0.7,5.0 1.1,4.6 2.4,3.3 1.3,4.4 0.6,5.1 |
DNA复制中的引物是()。
A.由DNA为模板合成的DNA片段
B.由RNA为模板合成的RNA片段
C.由DNA为模板合成的RNA片段
D.由RNA为模板合成的RNA片段
E.引物仍存在于复制完成的DNA链中
对一个克隆的DNA片段作物理图谱分析,需要用()。
A.核酸外切酶
B.限制性内切酶 C DNA连接酶
C.脱氧核糖核酸酶
A.杂交已经成为检测靶DNA片段的一种基本技术
B.可将与靶片段序列互补的DNA寡核苷酸单链标记示踪物
C.可通过显现示踪分子来定位靶DNA
D.其中标记有示踪物的寡核苷酸片段叫做探针
冈崎片段是()。
A.EcoR I消化产物
B.滞后链上合成的DNA片段
C.DNA聚合酶的催化功能域
D.酵母中自主复制的DNA片段