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[单选题]
PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为()。
A.模板
B.引物
C.dNTP
D.镁离子
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A.体系加热到95℃，使目标DNA链解旋为单链
B.温度降为退火温度，使引物(人工合成)特异互补结合到目标DNA链上
C.温度升至多聚酶高效工作温度(一般为72°)，DNA多聚酶催化附着在模板链上的引物延长形成新的DNA链
D.引物可以和任意DNA链延伸
A.设计引物时应考虑使3端引物和5端引物具有相似的Tm值
B.每条引物自身不应有稳定的发夹结构
C.上下游引物之间不宜形成稳定的二聚体结构
D.引物的5和3端必须和模板严格配对结合
E.引物与非特异扩增区的序列无同源性
A.以RNA为模板合成双链DNA
B.逆转录的合成原料为4种dNTP
C.逆转录与转录相似，均不需要引物
D.RNA:DNA杂化双链为过程的中间产物
E.逆转录酶可催化模板RNA水解
A.也被称为多重引物PCR或复合PCR
B.是在同一PCR反应体系里加入两对或两对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应
C.其反应原理、反应试剂和操作过程与一般PCR完全不同
D.美国科学家JSChamberlain在Duchenne型肌营养不良基因座缺失的研究中首次引用了多重PCR的概念
E.多重PCR技术已被广泛应用于核酸诊断的各个领域，包括基因敲除分析、突变和多态性分析、定量分析及RNA检测
A.引物的长度在18bp-25bp
B.引物内部不能存在连续的互补序列，防止产生二聚体和发夹结构
C.引物中G+C的含量占45%-55%
D.引物的3`端可以带有生物素、荧光或酶切位点等作为标记
E.两条引物的Tm值应该尽量相近
A.利用核苷二磷酸合成多核苷酸链
B.RNApol要引物，并在其中5′端添加碱基
C.DNApol能同时在链两端加入核苷酸
D.DNApol只能以RNA为模板合成DNA
E.RNApol和DNApol都只能在核苷酸链3′端加入单核苷酸
